AF532546555 568594 Human Serum Albumin 各个染料的定义与光谱特性 ypxx.net

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AF532 Human Serum Albumin,AF532标记人血清白蛋白

AF546 Human Serum Albumin,AF546标记人血清白蛋白

AF555 Human Serum Albumin,AF555标记人血清白蛋白

AF568 Human Serum Albumin,AF568标记人血清白蛋白

AF594 Human Serum Albumin,AF594标记人血清白蛋白

一、基本定义

AF Human Serum Albumin(AF-HSA)是指将 Alexa Fluor(AF)系列荧光染料(如 AF532、AF546、AF555、AF568、AF594)通过 NHS酯(N-Hydroxysuccinimide ester) 活化基团共价偶联至 人血清白蛋白(Human Serum Albumin, HSA) 上的试剂或探针。

人血清白蛋白(HSA):作为载体蛋白,具有良好的生物相容性和溶解性,能显著降低染料的非特异性吸附和聚集。

结构组成特点

人血清白蛋白的结构高度复杂且高度保守,主要特点如下:

单体结构:由585个氨基酸组成,分子量约为66.5 kDa。

二硫键:含有17个二硫键,其中34个半胱氨酸形成了这些二硫键,具有极高的化学稳定性。

心形构象:整体呈现心形结构,由三个同源的结构域组成,每个结构域又分为两个亚域(A和B),富含α-螺旋结构。

疏水结合位点:主要的配体结合位点位于亚域IIA(Site I)和亚域IIIA(Site II),负责结合脂肪酸、药物等分子。

Alexa Fluor 染料:属于有机染料家族,具有极高的光稳定性、量子产率和水溶性,适合长时间活细胞成像和流式细胞术。

各个染料的定义与光谱特性

AF532 HSA:激发波长 (nm) 532;发射波长 (nm)553;属于黄绿色荧光染料,适用于绿光/黄光通道的成像和检测。

AF546 HSA:激发波长 (nm) 556;发射波长 (nm)573;属于橙红色荧光染料,常用于橙色荧光通道,兼容 561 nm 激光器。

AF555 HSA:激发波长 (nm) 552 (或 555);发射波长 (nm)565 (或 572);属于红色荧光染料,广泛用于红色荧光通道(Cy3/AF555 通道),具有较高的亮度。

AF568 HSA:激发波长 (nm) 578;发射波长 (nm)603;属于深红色荧光染料,兼容 568 nm 或 594 nm 激光器,耐光性极佳。

AF594 HSA:激发波长 (nm) 590;发射波长 (nm)617;属于深红色荧光染料,激发峰略长于 AF568,常用于深红/远红通道(Cy5/AF594 通道)。

二、相同功能(Shared Functions)

所有 AF-HSA 试剂在功能上具有以下共同点:

荧光标记:均用于对 HSA 或 HSA 结合的目标(如纳米粒子、抗体、受体)的荧光标记。

细胞/组织成像:适用于活细胞成像(Fluorescence Microscopy)、免疫荧光染色(Immunofluorescence Staining)和组织切片染色。

流式细胞术:可作为流式细胞术(Flow Cytometry)中的荧光探针,用于细胞表面标记或细胞内染色。

追踪与定量:由于 HSA 的高生物相容性,可用于追踪体内药物分布或体外细胞摄取情况。

共同优势(Common Advantages)

高光稳定性:Alexa Fluor 系列普遍具有极佳的光稳定性,适合长时间成像和多次曝光。

生物相容性:HSA 作为载体能显著降低染料的细胞毒性和非特异性吸附,提高标记的特异性和生物相容性。

低自发荧光:相较于 FITC 等传统染料,AF 染料在细胞或组织中的自发荧光更低,信噪比更高。

水溶性强:具有极佳的水溶性,无需有机溶剂即可使用。

三、使用场景(Use Cases)

活细胞成像:由于 HSA 的良好生物相容性,AF-HSA 常用于追踪细胞摄取、膜受体分布等活细胞实验。

药物递送研究:用于标记脂质体、聚合物纳米粒子或药物载体,追踪其在体内的分布和释放情况。

免疫荧光染色:作为二抗(如抗兔 IgG)的标记物,或者直接标记 HSA 进行组织学染色。

流式细胞术:用于多色流式分析,区分不同的细胞群体或检测细胞表面受体的表达水平。

FRET 实验:利用不同波长的 AF 染料进行荧光共振能量转移(FRET)实验,研究蛋白质相互作用。

四、新研博美目录列表:

6-Azidohexanoic acid

79598-53-1

TCO-NH2, HCl salt

TCO-Amine HCl Salt

1609659-02-0

TCO-NH2, HCl salt

HMSiR-Carbamate-PEG2-BCN

HMSiR-Carbamate-Me

5-FAM amine HCl

AMCA-Alkyne,AMCA-Alk

Alexa Fluor 568 Maleimide

AF 568 CTB

Alexa Fluor568 SE

Annexin V Alexa Fluor 568

biotin-PEG11-amine

biotin-PEG3-(CH2)3-NH2 TFA salt

N-Boc-N-bis(PEG3-azide)

m-PEG3-sulfone-PEG2-OH

Acid-PEG4-sulfone-PEG4-acid

N-Mal-N-bis(PEG4-amine) TFA salt

温馨提示:

试剂仅用于科研实验,不可用于人体~~~~~编辑作者:陕西新研博美木南