ABG substrate aglycon-d5 用于糖苷酶活性测定和底物特异性研究  的原理 ypxx.net

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简单介绍

ABG Substrate Aglycon-d5是一种氘代标记的糖苷配基(aglycon)衍生物,常用于糖苷酶(如β-glucosidase)的底物特异性研究、代谢动力学分析及定量检测。作为氘代内标物,它通过同位素稀释法提升LC-MS/GC-MS等分析方法的准确性,广泛应用于药理学、代谢组学及酶学研究。其氘代设计(d5表示5个氢原子被氘取代)赋予代谢惰性,适用于追踪生物体内aglycon的代谢途径或作为内标校正仪器响应。

结构特点

化学结构:分子式通常包含氘代aglycon骨架(如芳香环、脂肪链)与糖苷基团,氘代位点分布于aglycon的特定氢原子(如苯环、侧链氢)。例如,若aglycon为苯基衍生物,d5可能标记苯环上的5个氢原子。

物理性质:氘代后分子量增加,熔点、溶解性可能微调,但保持与天然aglycon相似的化学稳定性。需避光、干燥保存,避免氘-氢交换。

同位素特性:氘(²H)的质量差异降低代谢酶(如CYP450)的催化效率,延长体内半衰期,同时保持生物活性与天然aglycon高度一致。

ABG substrate aglycon-d5 用于糖苷酶活性测定和底物特异性研究 的原理、应用特点

基本原理

核心作用机制:该化合物是一种氘代(D5)的糖苷底物。其核心原理是利用氘(D)原子替代氢(H)原子,在底物上引入一个稳定且可检测的同位素标签。糖苷酶(如β-葡萄糖苷酶)会催化水解该底物的糖苷键,释放出氘标记的配基(Aglycon-d5)。

检测与分析优势:释放出的氘代配基或整个反应产物,因其独特的质量数,可以通过高灵敏度的分析技术进行特异性检测和定量。最常用的方法是液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)。氘代化合物在质谱中会产生确定的质量偏移,从而与内源性未标记化合物清晰区分,极大降低了背景干扰,实现了高特异性、高灵敏度的检测。

应用特点

高特异性与低背景:这是其最突出的优点。在复杂的生物样品(如细胞裂解液、组织匀浆)中,使用氘代底物可以准确测定目标糖苷酶(如UDP-葡萄糖:神经酰胺葡萄糖基转移酶UGCG)的活性,而几乎不受样品中其他成分的干扰。

用于精确的动力学与机理研究:

底物特异性研究:通过合成不同结构(如不同糖基或不同氘代位点)的类似物,可以系统地探究糖苷酶对底物不同部分的识别和催化要求。

动力学同位素效应研究:氘代可以引入动力学同位素效应(KIE)。通过比较氘代底物与普通底物的反应速率(kH/kD),可以揭示反应过渡态的结构信息,例如糖苷键断裂和质子转移的相对程度,是研究糖苷酶催化机理的精密工具。

适用于体内外多种场景:

体外酶活测定:如前所述,可用于高特异性的体外酶活性检测和抑制剂筛选。

体内代谢示踪:氘代底物可作为代谢探针,用于体内代谢成像(如氘代谢成像,DMI)或药代动力学研究,追踪糖苷类物质的代谢命运。

作为内标物:在质谱定量分析中,氘代化合物本身就是近乎完美的内标,因其化学性质与待测物几乎一致,但在质谱信号上可区分,用于校正样品前处理和离子化过程中的变异,提高定量的准确度和精密度。

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&凯新试剂参数

试剂名称:ABG substrate aglycon-d5

外观:固态粉末或颗粒

运输:低温运输

包装:瓶装

纯度:≥95%

规格:1g、5g、10g

溶解性:溶于部分有机溶剂以及水

生产:西安凯新生物科技有限公司

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注意:本试剂用于科研领域,其他用途概不适用!

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