79642-50-5,Disuccinimidyl glutarate其两端NHS酯基团可与蛋白质赖氨酸残基的ε-氨基及肽段N端的α-氨基反应,形成稳定的酰胺键 ypxx.net

【Part 1:基础知识】

中文名:双琥珀酰亚胺戊二酸酯

CAS:79642-50-5

英文名:Disuccinimidyl glutarate(DSG)

分子式:C13H14N2O8

分子量:326.26

供应商:陕西新研博美生物科技有限公司

【Part 2:理化性质】

溶解性:

DSG不溶于水(water-insoluble),需先溶解于有机溶剂中再加入到水性交联反应体系。推荐溶剂为DMSO或DMF。典型浓度参考:在DMSO和DMF中具有良好的溶解性;在甲醇中可轻微溶解(需超声处理);在水中部分溶解。建议使用高纯度无水DMSO或DMF配制储备液。

光谱数据:

DSG本身不具备荧光特性,其分子结构中无荧光发色团。该化合物作为交联剂使用,通过NHS酯基团与伯胺反应形成共价键,不产生光谱信号。鉴于该化合物本身不具备荧光特性,常规文献中不提供其激发波长、发射波长及消光系数参数。

pH敏感性:

DSG的NHS酯基团对水分敏感,易发生水解。NHS酯与伯胺的反应在pH 7.0–9.0的缓冲体系中进行最为有效,推荐使用pH 7.2–8.5的磷酸盐缓冲液(PBS)或HEPES缓冲液。在碱性条件下(pH > 8.5),NHS酯的水解速率加快,会降低交联效率。在酸性条件下(pH < 6),伯胺的质子化程度增加,亲核反应活性降低。反应体系中应避免使用含伯胺的缓冲液(如Tris、甘氨酸),以免竞争消耗交联剂。

【Part 3:相关应用】

应用1:蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)与结构蛋白质组学研究

DSG是一种细胞膜可穿透(membrane-permeable)、不可裂解(non-cleavable)的同型双功能交联剂,其两端NHS酯基团可与蛋白质赖氨酸残基的ε-氨基及肽段N端的α-氨基反应,形成稳定的酰胺键。

应用2:抗体-药物偶联物(ADC)与靶向生物偶联

DSG是一种广泛应用于抗体-药物偶联物(ADC)构建和靶向生物偶联研究的连接子试剂。作为一种可降解(cleavable)的ADC连接子,DSG可用于合成抗体偶联药物。

应用3:细胞内蛋白质与多肽的标记与交联

DSG具有细胞膜穿透性,可实现对细胞内多肽和蛋白质的标记与交联。NHS酯与赖氨酸残基及肽段N端的胺基反应,形成共价酰胺键并释放NHS基团。

【Part 4:同系列试剂(≥20个)】

二琥珀酰亚胺辛二酸酯(Disuccinimidyl suberate / DSS),CAS: 68528-80-3

二琥珀酰亚胺癸二酸酯(Disuccinimidyl sebacate / DSSeb),CAS: 143776-71-0

二琥珀酰亚胺酒石酸酯(Disuccinimidyl tartrate / DST),CAS: 135791-02-9

二琥珀酰亚胺丙酸酯(Disuccinimidyl propionate / DSP),CAS: 57757-57-0

二硫代双(琥珀酰亚胺丙酸酯)(Dithiobis(succinimidyl propionate) / DSP),CAS: 57757-57-0

双琥珀酰亚胺辛二酸酯-d4(Disuccinimidyl suberate-d4 / DSS-d4),CAS: 不适用

DSG-d4(Disuccinimidyl glutarate-d4),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺戊二酸酯-d6(Disuccinimidyl glutarate-d6 / DSG-d6),CAS: 不适用

双琥珀酰亚胺壬二酸酯(Disuccinimidyl azelate / DSAz),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺己二酸酯(Disuccinimidyl adipate / DSA),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺丁二酸酯(Disuccinimidyl succinate / DSSc),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺富马酸酯(Disuccinimidyl fumarate / DSF),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺磺基辛二酸酯(Bis(sulfosuccinimidyl) suberate / BS3),CAS: 82436-77-9

二琥珀酰亚胺辛二酸酯-d4(Bis(sulfosuccinimidyl) suberate-d4 / BS3-d4),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺亚砜(Disuccinimidyl sulfoxide / DSSO),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺二丁基脲(Disuccinimidyl dibutyric urea / DSBU),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺戊二酸酯-d4(Disuccinimidyl glutarate-d4 / DSG-d4),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺苯二甲酸酯(Disuccinimidyl phthalate / DSP),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺对苯二甲酸酯(Disuccinimidyl terephthalate / DSTP),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺碳酸酯(Disuccinimidyl carbonate / DSC),CAS: 74124-79-1

二琥珀酰亚胺草酸酯(Disuccinimidyl oxalate / DSO),CAS: 不适用

二琥珀酰亚胺马来酸酯(Disuccinimidyl maleate / DSM),CAS: 不适用

【Part 5:注意事项】

反应条件建议(pH、温度、时间):

交联反应:DSG需先溶解于无水DMSO或DMF中,再加入到水性交联反应体系。推荐反应缓冲液为不含伯胺的PBS或HEPES缓冲液(pH 7.2–8.5),反应在室温(20–25°C)下进行,孵育时间通常为30分钟至2小时。DSG的NHS酯与伯胺反应形成稳定的酰胺键并释放NHS基团。

双交联方案(ChIP) :DSG常与甲醛联合使用。推荐顺序为先进行DSG交联(室温,30–45分钟),再进行甲醛固定。

pH条件:NHS酯与伯胺的反应在pH 7.0–9.0范围内有效,推荐pH 7.2–8.5。避免在含伯胺的缓冲液(如Tris、甘氨酸)中使用。

温度条件:反应在室温下进行即可。该产品应在-20°C避光、干燥条件下长期保存。

避光储存要求:

DSG对水分和光敏感(moisture-sensitive, hygroscopic)。应在-20°C避光、干燥条件下密封保存。建议储存于带干燥剂的密封容器中(Desiccate),避免反复冻融。取用时应避免长时间暴露于环境光线和空气中。未使用完毕的试剂应立即密封并返回-20°C保存。产品在正确储存条件下(-20°C,避光,干燥)有效期至少为12–24个月。

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