LumiTracker Lyso Red是一种红色荧光染料,可选择性地积聚在具有低内部pH的细胞器中 ypxx.net

【Part 1:基础知识】

中文名:LumiTracker 溶酶体红色荧光探针

英文名:LumiTracker Lyso Red

供应商:陕西新研博美生物科技有限公司

包装:

【Part 2:理化性质】

外观:黄色液体。该产品以1 mM DMSO溶液形式供应。纯度规格:经1H NMR和HPLC-MS检测,纯度≥95%。

溶解性:该试剂以1 mM DMSO储备液形式提供。推荐溶剂为DMSO,典型浓度为1 mM(储备液)。该染料为亲脂性、细胞渗透性荧光探针,可自由穿过细胞膜进入细胞。工作浓度通常为50–75 nM(用1× PBS或细胞培养基稀释),具体浓度需根据细胞类型进行优化。

光谱数据:

吸收/激发波长(Ex) :577 nm

发射波长(Em) :590 nm

摩尔消光系数(ε) :98,000 M-1cm-1

荧光量子产率:0.13

该染料的核心结构属于BDP(硼二吡咯亚甲基/BODIPY)荧光染料家族,具有强疏水特性,提供了良好的细胞膜通透性。其光谱特性与TRITC滤光片组高度匹配,适用于标准红色荧光通道成像。

pH敏感性:

LumiTracker Lyso Red是一种带有弱碱基团的荧光探针。在中性pH条件下(如细胞外环境pH 7.4),弱碱基团未被完全质子化,染料分子保持相对不带电状态,有利于自由穿过细胞膜。进入溶酶体后,其内部为酸性环境(pH约4.5–5.0),弱碱性基团发生质子化,形成带正电荷的分子,从而被“捕获”并滞留在溶酶体内,实现对酸性细胞器(如溶酶体、晚期内体)的选择性标记。该染料的荧光强度与溶酶体的酸性环境直接相关,而非溶液pH的简单线性变化。该染料在577 nm处有最大吸收,在590 nm处发射。

【Part 3:相关应用】

应用1:活细胞溶酶体的特异性标记与荧光成像

LumiTracker Lyso Red是一种红色荧光染料,可选择性地积聚在具有低内部pH的细胞器中,特别适用于对维持酸性环境的活细胞溶酶体进行染色。

应用2:自噬、胞吞与胞内运输研究

LumiTracker Lyso Red可用于研究自噬(autophagy)、胞吞(endocytosis)和胞内运输(intracellular trafficking)等细胞生物学过程。

应用3:溶酶体pH动态监测与功能评估

由于LumiTracker Lyso Red的质子化依赖于溶酶体内部的酸性环境,该探针的积累和滞留可间接反映溶酶体的pH状态和功能完整性。

应用4:固定后细胞的兼容性染色与多色标记

LumiTracker Lyso Red染色后,细胞可进行醛类固定处理。这一特性使其与后续的免疫荧光(immunofluorescence)实验兼容——可先对活细胞进行溶酶体染色,然后进行固定和透化处理,再开展目的蛋白的免疫荧光染色,实现溶酶体定位与特定蛋白表达的原位共定位分析。

【Part 4:同系列试剂(≥20个)】

LumiTracker Lyso Green(LumiTracker溶酶体绿色荧光探针),CAS: 不适用

LumiTracker Lyso Blue(LumiTracker溶酶体蓝色荧光探针),CAS: 215247-93-1

LysoTracker Red DND-99(溶酶体红色荧光探针DND-99),CAS: 231946-72-8

LysoTracker Green DND-26(溶酶体绿色荧光探针DND-26),CAS: 201860-17-5

LysoTracker Blue DND-22(溶酶体蓝色荧光探针DND-22),CAS: 不适用

LysoTracker Yellow HCK-123(溶酶体黄色荧光探针HCK-123),CAS: 不适用

LysoTracker Deep Red(溶酶体深红色荧光探针),CAS: 不适用

LysoSensor Green DND-189(溶酶体pH敏感性绿色荧光探针DND-189),CAS: 不适用

LysoSensor Blue DND-167(溶酶体pH敏感性蓝色荧光探针DND-167),CAS: 不适用

LysoSensor Yellow/Blue DND-160(溶酶体pH比率型荧光探针DND-160),CAS: 不适用

MitoTracker Red CMXRos(线粒体红色荧光探针),CAS: 167095-09-2

MitoTracker Green FM(线粒体绿色荧光探针),CAS: 201860-17-5

MitoTracker Deep Red FM(线粒体深红色荧光探针),CAS: 不适用

ER-Tracker Green(内质网绿色荧光探针),CAS: 不适用

ER-Tracker Red(内质网红色荧光探针),CAS: 不适用

Golgi-Tracker Green(高尔基体绿色荧光探针),CAS: 不适用

Golgi-Tracker Red(高尔基体红色荧光探针),CAS: 不适用

CellTracker Green CMFDA(细胞示踪绿色探针CMFDA),CAS: 136832-63-8

CellTracker Orange CMTMR(细胞示踪橙色探针CMTMR),CAS: 323192-14-9

CellTracker Red CMTPX(细胞示踪红色探针CMTPX),CAS: 150347-59-4

BDP TR methyl ester(BDP TR甲酯,亲脂性细胞器复染剂),CAS: 不适用

DND-167(蓝色荧光pH指示剂,酸性细胞器染色),CAS: 不适用

【Part 5:注意事项】

反应条件建议(pH、温度、时间):

储备液:该产品以1 mM DMSO溶液形式供应。使用前应根据实验需求用1× PBS或细胞培养基稀释至工作浓度。建议现配现用,避免反复冻融。

工作浓度:推荐工作浓度为50–75 nM。不同细胞系的最佳染色浓度可能存在差异,建议在初次实验时进行浓度梯度优化。

染色条件:将稀释后的染色液预热至37°C,在1× PBS中于37°C孵育细胞3–7分钟(成像前进行)。该染料被活细胞摄取的速度极快,短时间孵育即可完成染色。长时间孵育(>7分钟)会导致溶酶体pH上升(“碱化效应”),影响溶酶体天然酸性环境,因此不建议长时间孵育。染色后可直接进行荧光显微镜观察,无需洗涤步骤。

固定处理:若需要进行固定,染色后可用3.7%甲醛等醛类固定剂处理细胞。需注意固定后背景染色水平可能升高。

pH条件:染色和成像建议在生理pH条件(pH 7.0–8.0)下进行。

温度条件:染色在37°C细胞培养条件下进行。该产品应在-20°C条件下长期保存。运输可在室温条件下进行,最长不超过2–3周。

避光储存要求:

LumiTracker Lyso Red对光敏感,应在-20°C避光、干燥条件下密封保存。建议储存于带干燥剂的密封容器中,避免反复冻融。取用时应避免长时间暴露于环境光线和空气中,建议在暗处或低光照条件下操作。未使用完毕的试剂应立即密封并返回-20°C保存。产品在正确储存条件下(-20°C,避光,干燥)有效期至少为12个月。

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