
Biotin-HPDP,生物素 - HPDP 交联剂 性质与功能
中文名称:生物素-HPDP 交联剂
英文名称:Biotin-HPDP
产地:西安齐岳生物可提供
包装:mg以及g级
纯度标准:≥95%(高纯级)
物理形态:固体/粉末/溶液
包装规格:50mg / 100mg / 250mg / 500mg(灵活选量)
贮存要求:低温避光存储
特别声明:本品为科研专用!禁止临床或人体应用!
我们提供这个产品,仅供科研,如有需要,欢迎咨询!
Biotin-HPDP 是巯基特异性可逆型生物素标记交联试剂,全称 N-[2-(生物素酰胺) 乙基]-2 - 吡啶二硫代丙酰胺,分子集成生物素亲和标签、吡啶二硫键(HPDP)巯基反应基团,是基于二硫键可逆偶联、用于蛋白巯基定点生物素化的经典杂双功能交联剂,广泛应用于蛋白互作、细胞膜巯基蛋白示踪、还原响应纳米载体修饰、靶向分离纯化等方向。产品为白色粉末,溶于无水 DMSO、DMF,几乎不溶于纯水;需低温无水避光密封储存,二硫键易被还原剂破坏,生物素遇强光氧化失活,水溶液现配现用,全程避免 DTT、β-ME 等还原剂接触。
分子分为两大核心功能单元,生物素亲和识别段与 HPDP 吡啶二硫巯基反应段,中间烷基连接臂降低空间位阻,两端功能互不干扰。末端生物素可与链霉亲和素、亲和素发生高特异性稳定结合,结合常数极高,耐受常规缓冲盐、温度、pH 波动;标记后不破坏蛋白原有空间构象与生理活性,可搭配荧光、HRP、磁珠标记链霉亲和素实现检测与富集,适配 Western blot、共聚焦成像、Pull-down 等多种实验体系。
核心反应基团 HPDP 吡啶二硫键是本品关键特征,具备巯基专一性与可逆断裂双重特性。在中性 pH 6.8–7.5 缓冲条件下,试剂吡啶二硫基团与蛋白、多肽、巯基磷脂表面游离半胱氨酸巯基发生二硫交换反应,生成稳定分子间二硫键,同时释放 2 - 巯基吡啶,该产物具备特征紫外吸收,可通过分光光度计定量监测标记反应程度,精准控制生物素修饰比例。
区别于马来酰亚胺类不可逆巯基交联剂,Biotin-HPDP 形成的偶联产物为还原敏感二硫键,当体系存在高浓度谷胱甘肽 GSH、DTT 等还原剂时,二硫键快速断裂,释放原始未修饰蛋白,实现可逆标记。该可逆特性是其核心优势,可用于捕获瞬时蛋白相互作用、胞内还原环境可控解离靶分子,规避不可逆交联无法回收天然蛋白的缺陷。中间烷基连接臂拉开生物素与二硫反应位点,消除空间遮挡,保证链霉亲和素高效结合生物素,同时提升试剂脂溶性,可穿透细胞膜标记胞内巯基蛋白。
标准实验流程分为标记、捕获、解离三步:中性无还原剂环境下与含巯基底物反应,透析去除游离 Biotin-HPDP;使用链霉亲和素磁珠捕获生物素化蛋白;加入还原剂洗脱,回收天然完整靶蛋白,无永久化学修饰损伤蛋白结构。
应用场景覆盖细胞生物学与生物材料领域:其一细胞表面、胞内巯基蛋白可逆生物素标记,捕捉瞬时蛋白互作复合物;其二巯基修饰脂质纳米粒、高分子载体表面生物素化,构建肿瘤高 GSH 还原响应型亲和靶向递送系统;其三 Pull-down 蛋白互作筛选,可逆洗脱获得天然互作蛋白,便于后续质谱鉴定;其四活细胞膜巯基蛋白荧光示踪,通过还原剂可控剥离标记信号做对照实验;其五生物传感器可逆捕获靶蛋白,实现芯片重复再生使用。
Biotin-HPDP 融合生物素高亲和识别、HPDP 吡啶二硫巯基定点偶联、还原可逆解离三大核心优势,可无损回收天然靶分子,是瞬时蛋白互作、还原响应型生物探针专用可逆生物素交联试剂。
Biotin-HPDP,生物素-HPDP 交联剂是巯基特异性可逆型生物素标记交联试剂
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