AF555-NHS（407627-68-3）磺化结构赋予良好水溶性，荧光稳定，适合多种生理条件
一、基本描述
AF555-NHS（Alexa Fluor 555 NHS Ester，也称AF555琥珀酰亚胺酯、AF555活性酯）是一种橙红色荧光染料活性酯，属于Alexa Fluor系列，是Sulfo-Cy3的类似物，常用于代替Cy3、TAMRA染料使用。
CAS号：407627-68-3
分子式：C₃₈H₄₇N₃O₁₆S₄
分子量：930.05
外观：橙红色固体粉末
纯度：≥95%
激发/发射波长：约 556 nm / 571 nm
消光系数：约 155,000 L·mol⁻¹·cm⁻¹
纯度：≥95%（HPLC检测）
产商：陕西新研博美
二、结构组成特点
核心荧光团：基于磺化罗丹明结构，通过引入磺酸酯基团显著提升水溶性和光稳定性。该结构使染料带负电荷、亲水性强，对pH不敏感（pH 4–10范围稳定）。
活性基团：分子末端带有NHS酯（N-羟基琥珀酰亚胺酯） 基团，能与目标分子（蛋白质、抗体、寡核苷酸等）上的伯胺基团（-NH₂） 发生快速、特异性的反应，生成稳定的酰胺键，实现共价荧光标记。
不改变蛋白极性：NHS酯与蛋白质表面胺基反应后，不改变蛋白质表面的极性，可降低疏水聚集和沉淀的风险。
三、优缺点
优点
荧光亮度高：高摩尔消光系数（155,000）与高量子产率，信号强度优异：
光稳定性好：在强光照射下抗光漂白能力优于传统罗丹明和Cy系列染料：
水溶性好：磺化结构赋予良好水溶性，也溶于DMSO、DMF等有机溶剂：
pH稳定性：在pH 4–10范围内荧光稳定，适合多种生理条件：
低背景干扰：低自发荧光背景，成像信噪比高：
缺点
光敏感性：对光敏感，需避光保存，长期储存需在-20°C以下且使用惰性气体保护。
水解倾向：NHS酯在含水溶液中性质不稳定，易水解失活，需在反应前新鲜配制工作液。
库存较少：有供应商显示该产品暂无库存，可能需要定制或采购同结构替代品。
四、更多同类型试剂（Alexa Fluor NHS酯系列）
AF350 NHS Ester：蓝色：346 / 442：紫外-蓝色通道成像、多色标记中作为蓝光通道
AF430 NHS Ester：蓝色-绿色：434 / 539：蓝光通道标记
AF488 NHS Ester：绿色：495 / 519：最常用，与FITC兼容，用于绿色通道成像
AF532 NHS Ester：黄绿色：532 / 554：绿色激光通道
AF546 NHS Ester：橙黄色：556 / 575：橙色通道标记
AF568 NHS Ester：橙红色：578 / 602：红色通道，光谱与AF555略有偏移
AF594 NHS Ester：红色：590 / 617：红色通道标记，光稳定性优秀
AF647 NHS Ester：远红外：650 / 665：常用，与Cy5兼容，组织穿透力强
AF680 NHS Ester：近红外：679 / 702：近红外通道，适用于动物活体成像
AF700 NHS Ester：近红外：702 / 723：近红外通道，避免组织自发荧光干扰
免责声明
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