
基本信息
- 英文名:Biotin-Nicotinamide、Biotin-NA
- 中文名:生物素-烟酰胺偶联物、生物素化烟酰胺
- 纯度:≥95%
- 外观:白色至淡黄色固体粉末
- 溶解性:易溶于PBS缓冲液(pH7.4)、二甲基亚砜(DMSO)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF),微溶于水
- 分子量:约450-500Da
- 保存条件:-20℃密封保存,避免反复冻融,保质期1年
- 产品规格:常见1mg、5mg、10mg等小剂量包装,仅用于科研用途
烟酰胺结构式:
烟酰胺
特性
- 双功能特性
- 同时具备生物素的亲和结合特性和烟酰胺的生物活性
- 可通过生物素-亲和素相互作用,将烟酰胺特异性结合到含有亲和素的表面或载体上
- 高亲和性
- 生物素与亲和素/链霉亲和素的结合常数高达10¹⁵M⁻¹,结合特异性强,稳定性高
- 结合反应迅速,可在常温下数分钟内完成
- 生物相容性
- 生物素是一种水溶性维生素,具有良好的生物相容性;烟酰胺作为一种临床常用的维生素类药物,其生物安全性已得到广泛验证
- 生物素化修饰不会显著影响烟酰胺的生物活性
- 靶向性
- 可通过生物素-亲和素相互作用,将烟酰胺靶向递送到特定组织或细胞
- 提高药物的治疗效果,降低毒副作用
制备方法
1. 活化生物素法
- 核心原理:先将生物素分子的羧基活化,再与烟酰胺的氨基发生共价反应,形成稳定的酰胺键。
- 具体步骤:
- 将生物素-NHS酯或生物素-琥珀酰亚胺酯溶于DMSO中,浓度为100mg/mL
- 将烟酰胺溶于PBS缓冲液(pH7.4)中,浓度为50mg/mL
- 在搅拌下将生物素溶液缓慢滴加到烟酰胺溶液中,生物素与烟酰胺的摩尔比为1.2:1
- 室温下反应2-4小时
- 反应液经透析(截留分子量3.5kDa)去除未反应的生物素和溶剂,冻干得白色固体
2. 连接臂介导法
- 适用场景:需要更长连接臂的偶联物制备
- 关键步骤:先在烟酰胺分子上引入含有氨基或巯基的连接臂,再与活化的生物素分子反应,形成偶联物
使用注意事项
- 储存条件:应密封保存于-20℃,避免反复冻融,以免影响生物活性
- 使用浓度:根据具体实验目的和体系,优化偶联物的使用浓度,通常为0.1-10μM
- 生物活性验证:使用前应验证偶联物的生物素结合活性和烟酰胺生物活性
- 特异性:实验中应设置适当的对照,排除非特异性结合的影响
- 安全性:烟酰胺具有一定的生物活性,操作时需佩戴防护装备(如手套、护目镜),避免与皮肤、眼睛等直接接触;如不慎接触,应立即用大量清水冲洗,并寻求医疗帮助
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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