Calcein-AM对湿气敏感,AM酯键遇水易水解(测量湿气的仪器) ypxx.net

A. 核心标识

A1.中文名称:钙黄绿素-乙酰氧基甲酯

A2.英文名称:Calcein-AM,Calcein acetoxymethyl ester,CAS:148504-34-1

A3.规格标准:纯度 ≥95%(HPLC);常见包装规格 1 mg / 5 mg / 10 mg / 50 mg,或 2 mM DMSO 溶液(0.1 mL / 0.5 mL),可按需定制

A4.保存条件:-20℃避光,避免反复冻融

A5.实验室:西安凯新生物科技有限公司

B. 基础物性

B2 溶解性:易溶于DMSO、DMF、乙醇等有机溶剂;在水相缓冲液(PBS)中溶解度较低,且水溶液不稳定,易水解

B3 稳定性说明:理化性质稳定,符合常规科研试剂要求。Calcein-AM本身无荧光,为疏水性非荧光化合物,分子中的乙酰氧基甲酯(AM)基团赋予其细胞膜渗透性。进入活细胞后,被细胞内源性非特异性酯酶水解,脱去AM基团,生成具有强绿色荧光的极性分子钙黄绿素(Calcein),因带负电荷而被滞留在细胞内。Calcein的激发/发射波长约为490/515 nm。Calcein-AM对潮湿环境敏感,酯键遇湿气易分解,需严格干燥密封保存。

C. 化学特征

C1 活性基团:乙酰氧基甲酯(acetoxymethyl ester, AM)基团。Calcein-AM是钙黄绿素(Calcein)的四个羧基被乙酰氧基甲酯取代、两个羟基被乙酰基取代后的衍生物。AM基团通过酯键与Calcein母体的羧基连接,中和了羧基的负电荷,使分子整体呈电中性,从而具备穿透活细胞膜的能力。进入细胞后,胞内酯酶识别并水解AM酯键,释放出Calcein。Calcein含四个羧酸基团,去质子化后带强负电荷,无法穿透细胞膜,因而被保留在活细胞内。死细胞因缺乏活性酯酶或膜完整性丧失,无法产生荧光信号,因此Calcein-AM仅对活细胞染色。

C2 建议操作环境:干燥、避光环境。Calcein-AM对湿气敏感,AM酯键遇水易水解,操作全程需保持干燥并避免强光照射。溶解建议使用无水DMSO,储存液配制成1 mM或2 mM浓度后应分装并密封保存于-20℃,避免反复冻融。

D. 科研应用

流式细胞术活细胞分析与分选:Calcein-AM可由488 nm激光激发,荧光发射在约530 nm处检测,与流式细胞仪的标准FITC通道兼容。可直接通过流式细胞仪在30分钟内完成活细胞群和死细胞群的区分与定量分析。

E. 同系列产品

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F. 储存与操作细则

F1 温度与光照:-20℃避光密封。

F2 冻融控制:禁止反复冻融,建议分装单次用量。Calcein-AM在潮湿环境中容易分解,粉末和储存液均需保持盖子密封严实,干燥保存。

F3 操作卫生:常规洁净环境,用后立即盖紧。

F4 用途限制:仅限实验室科研,禁临床/食品/工业。

G. 结语

避光干燥存放,仅科研用途。以上由西安凯新生物科技 wudong 整理,欢迎交流。