Alexa Fluor488 DBCO，AF488 二苯基环辛炔，适配长时间活细胞成像实验|科技 |基团 |荧光 |产品 |成像 |标记

Alexa Fluor488 DBCO，AF488 二苯基环辛炔，适配长时间活细胞成像实验 ypxx.net

基础参数栏：

英文名称：AF488-DBCO，Alexa Fluor488 DBCO，AF488-DBCODibenzocyclooctyne

中文名称：Alexa Fluor 488-二苯并环辛炔，AF488 二苯基环辛炔

分子式：C48H49N5O11S2

分子量：936.08

产品纯度：95%+

外观性状：亮橙红色结晶性粉末

储存条件：-20℃干燥避光密封储存，严格隔绝叠氮类试剂与强氧化性物质，避免反复开盖接触空气，长期充入高纯氩气可稳定放置12个月以上

用途：通过DBCO基团与叠氮基团的无铜应变促进环加成反应，对叠氮修饰的生物分子进行高特异性AF488绿色荧光标记，完全规避铜离子的细胞毒性，广泛应用于活细胞与活体层面的生物正交荧光成像

产品介绍

AF488-DBCO是面向新一代无铜点击化学场景开发的高性能绿色荧光生物正交标记试剂。该产品将Alexa Fluor 488标志性的磺化亲水高亮度荧光母核与二苯并环辛炔基团通过稳定的亲水连接臂共价结合，在完整保留AF488染料超低非特异性吸附、超高光稳定性核心优势的同时，赋予分子无铜点击化学反应活性，完全规避了传统铜催化点击化学中铜离子导致的细胞毒性与荧光淬灭问题，是活细胞内低丰度生物分子高信噪比示踪的核心专用试剂。

作用机理

AF488-DBCO的定点荧光标记依托应变促进的叠氮-炔环加成反应实现。在生理温度的水相缓冲体系中，分子中的DBCO二苯并环辛炔基团无需铜离子催化，即可与叠氮修饰的生物分子发生高效的环加成反应，生成稳定的三唑共价键，将AF488高性能绿色荧光团定点连接到叠氮标记的蛋白、核酸、聚糖等各类生物分子上。整个反应过程无任何金属催化剂参与，不会对细胞产生毒性，也不会导致荧光团发生淬灭，反应副产物仅为环加成产物，无需额外纯化步骤即可直接用于后续成像实验。

性能参数与核心优势

AF488-DBCO的纯度稳定在95%以上，不含游离AF488荧光团与DBCO水解失活杂质，批次间的点击反应活性与荧光性能高度均一，相同实验条件下的叠氮底物标记效率可达92%以上。相比传统FITC-DBCO类衍生物，该产品的荧光量子产率提升了42%，分子上的多个磺化基团赋予其极强的水溶性，在无任何有机助溶剂的纯缓冲体系中也能完全溶解，不会发生疏水聚集。其495nm的激发波长可完美适配所有常规荧光设备的488nm激光通道，荧光亮度与抗光漂白性能均远超同波段的其他无铜点击荧光染料，标记后的探针非特异性吸附降低了65%，成像背景几乎可以忽略。

应用领域

AF488-DBCO可用于活细胞表面聚糖的代谢标记示踪。将该试剂与经过非天然糖代谢标记引入叠氮基团的活细胞共孵育，通过无铜点击反应将AF488荧光团定点连接到细胞表面的聚糖分子上，在完全不损伤细胞活性的前提下实现细胞膜聚糖的长时间动态成像追踪，获得比传统铜催化点击标记更清晰、更稳定的成像结果。该产品也可用于活体层面的肿瘤靶向荧光标记。将叠氮修饰的靶向肿瘤抗体通过尾静脉注射进入小鼠体内，待抗体在肿瘤部位充分富集后，再注射低剂量的AF488-DBCO试剂，通过肿瘤部位的原位无铜点击反应实现肿瘤的高信噪比绿色荧光成像，完全避免了铜离子导致的体内组织损伤与荧光淬灭问题。该产品还可用于新生蛋白的荧光标记示踪。将非天然叠氮氨基酸加入细胞培养基中，让新合成的蛋白带上叠氮标记，随后加入AF488-DBCO试剂，通过无铜点击反应特异性标记细胞内的新生蛋白，实现细胞内蛋白合成过程的原位荧光追踪，完全不会干扰细胞的正常生理活动。